于和伟，1971年5月4日出生于辽宁省抚顺市东洲区，中国内地男演员，毕业于上海戏剧学院96届表演本科班。
2003年，参演高希希执导的电视剧《历史的天空》；2004年，参演电视剧《搭错车》，饰演反一号苏民生。2009年，在古装剧《三国》中饰演刘备。2011年，与王丽坤主演电视剧《青盲之越狱》。2011年获南方盛典最佳男演员奖《幸福在路上》，2012年5月22日获得MSN星月年度最具价值男演员奖。
2015年，于和伟领衔主演的现代青春励志剧《警花与警犬》在北京拍摄 。加盟《极限挑战大电影》拍摄。主演的电影《过年好》定档大年初一。
2016年，主演三国战争题材权谋古装剧《军师联盟》。主演都市情感轻喜剧《下一站，别离》。
2017年，于和伟担纲艺术总监并领衔主演电视剧《猎毒人》。
2018年，凭借《大军师司马懿之军师联盟》获得第24届上海电视节举行“白玉兰奖”最佳男配角。同年8月10日，其参演电影《一出好戏》上映。11月，主演由路阳执导的悬疑电影《刺杀小说家》，搭档雷佳音、杨幂、董子健等。